
藥敏試驗(yàn)怎么做:紙片擴(kuò)散法實(shí)驗(yàn)詳解


藥敏試驗(yàn),又稱藥物敏感度試驗(yàn)或耐藥試驗(yàn),是一種用來評(píng)估某一種微生物(如病毒、細(xì)菌等)對(duì)特定抗生素的敏感程度或耐受程度的檢測(cè)方法。在藥敏試驗(yàn)中,常用的藥物指的是抗生素類藥物,而微生物的敏感度主要包括對(duì)該藥物的敏感、中介和耐藥三種情況。通過藥敏試驗(yàn),可以幫助醫(yī)療專業(yè)人員選擇最有效的藥物治療感染病原體,從而提高治療效果并減少抗生素濫用的風(fēng)險(xiǎn)。
作為第三方檢測(cè)中心,中科檢測(cè)機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測(cè)資質(zhì),檢測(cè)設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學(xué)可靠,可出具國家認(rèn)可的藥物藥敏試驗(yàn)報(bào)告。
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藥敏試驗(yàn)的目的主要包括三個(gè)方面。首先,通過藥敏試驗(yàn)可以指導(dǎo)治療,幫助醫(yī)療從業(yè)人員了解病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感或耐受程度,從而合理選擇抗生素類藥物進(jìn)行治療,避免盲目使用藥物,降低治療過程中的成本,并縮短治療周期。
其次,藥敏試驗(yàn)也可用于耐藥監(jiān)測(cè),及時(shí)發(fā)現(xiàn)和解決由抗生素濫用導(dǎo)致的耐藥性問題,對(duì)維護(hù)公共衛(wèi)生安全和控制傳染病的傳播十分重要。
最后,藥敏試驗(yàn)還可以用于新藥驗(yàn)證,通過與現(xiàn)有藥物的對(duì)比試驗(yàn)評(píng)估新藥對(duì)病原微生物的抑制或殺滅效果,為新藥的臨床應(yīng)用提供依據(jù),也是驗(yàn)證新藥療效和安全性的重要手段之一。
紙片擴(kuò)散法基本原理
紙片擴(kuò)散法是一種常用的藥敏試驗(yàn)方法,其基本原理是將浸有抗菌藥的紙片貼在涂有致病菌的瓊脂平板上。隨著紙片中所含的藥物溶解并不斷擴(kuò)散,形成遞減的梯度濃度,周圍形成抑菌圈。
在抑菌圈范圍內(nèi),待檢菌的生長被抑制,并產(chǎn)生透明的抑菌圈。抑菌圈的直徑大小反映了待測(cè)菌對(duì)抗菌藥物的敏感程度,通常與該藥對(duì)待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,即抑菌圈愈大,MIC值愈小。這種方法可快速、簡便地評(píng)估細(xì)菌對(duì)特定抗生素的敏感性,為醫(yī)療決策提供重要參考依據(jù)。
紙片擴(kuò)散法具體步驟
制備菌懸液:從過夜培養(yǎng)的菌落中挑取細(xì)菌,接種到生理鹽水中,調(diào)整懸液的濁度至0.5麥?zhǔn)蠁挝弧?/p>
接種平板:用無菌棉簽將菌懸液均勻涂布在瓊脂平板表面,確保細(xì)菌分布均勻。
放置藥敏紙片:將含有定量抗菌藥物的紙片貼在接種好的瓊脂平板上,確保紙片與瓊脂表面完全接觸。
孵育:將平板倒置于35℃的孵箱中孵育16-18小時(shí)。
測(cè)量抑菌圈:孵育后,用游標(biāo)卡尺測(cè)量紙片周圍的抑菌圈直徑,根據(jù)抑菌圈的大小判斷細(xì)菌對(duì)藥物的敏感性。
結(jié)果分析
抑菌圈的大小反映了細(xì)菌對(duì)抗菌藥物的敏感程度。抑菌圈越大,表示細(xì)菌對(duì)該藥物越敏感。根據(jù)抑菌圈的直徑,可以將細(xì)菌對(duì)藥物的反應(yīng)分為敏感(S)、中介(I)和耐藥(R)三種類型。
"敏感"表示使用某種藥物的常規(guī)劑量時(shí),能夠有效治療該種細(xì)菌引起的感染,因?yàn)樗幬镌隗w內(nèi)的平均血藥濃度達(dá)到MIC的5倍或以上。
"中介"指在應(yīng)用較高劑量的抗菌藥物時(shí)才能有效抑制細(xì)菌引起的感染,或者細(xì)菌處于體內(nèi)抗菌藥物濃縮的部位或體液中時(shí)才被抑制。通常,中介狀態(tài)下的平均血藥濃度接近或略高于細(xì)菌的MIC。對(duì)于毒性較小的藥物,通過適量增加劑量也可獲得良好的臨床治療效果。
"耐藥"表示該藥物對(duì)某一細(xì)菌的MIC高于在血液或體液中可能達(dá)到的濃度,或者細(xì)菌產(chǎn)生滅活抗菌藥物的酶或其他耐藥機(jī)制。即使該細(xì)菌的MIC較低,仍應(yīng)判斷該細(xì)菌屬于耐藥狀態(tài)。舉例來說,對(duì)產(chǎn)生青霉素酶的金黃色葡萄球菌而言,其對(duì)青霉素即屬于耐藥狀態(tài)。
根據(jù)紙片擴(kuò)散法的藥敏試驗(yàn)結(jié)果,可準(zhǔn)確評(píng)估細(xì)菌對(duì)抗生素的敏感情況,為醫(yī)療決策提供重要指導(dǎo)。
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電話:400-133-6008
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