
如何評價化妝品美白功效?體外測試法及在體測試法詳細介紹


皮膚顏色是人體皮膚表面呈現(xiàn)出的色度、色澤,是判斷皮膚、身體健康與否的重要標準。隨著人們對美白化妝品需求的增長,宣稱具有美白功效的化妝品及其原料的產(chǎn)品與日俱增。那么,如何科學(xué)、客觀地評價化妝品及其原料的美白功效呢?
中科檢測是專業(yè)的化妝品檢測與功效評價中心,經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理部門確認可承擔(dān)化妝品注冊和備案檢驗等工作,可提供化妝品美白功效評價、化妝品安全性評價、化妝品安全檢測等化妝品安全相關(guān)服務(wù)。
化妝品美白功效評價方法:體外測試法
(一)酪氨酸酶活性抑制實驗
人體膚色的差異主要取決于黑色素的含量及其分布,黑色素主要形成于人體皮膚表皮基底層的黑色素細胞,黑色素細胞組織中的酪氨酸在酪氨酸酶等酶的作用下,經(jīng)多巴、多巴醌、多巴色素、二羥基吲哚等中間體逐步轉(zhuǎn)化為真黑色素。其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶,其活性大小決定黑色素形成的數(shù)量。對酪氨酸酶抑制作用的強弱可作為評價增白化妝品的重要參考指標。
酪氨酸酶活性抑制試驗是利用從蘑菇中提取到的酪氨酸酶,以-酪氨酸或L-多巴為底物,在體系中加入待測物、對照品和酪氨酸酶等成分進行反應(yīng),并測量其吸光值,計算得到酪氨酸酶抑制率,從而表征待測物對酪氨酸酶活性的抑制。
(二)抗氧化、抗炎試驗
由于紫外線、體內(nèi)代謝等內(nèi)外因素均會促使機體產(chǎn)生氧自由基、炎癥因子等。自由基是人體代謝過程中產(chǎn)生的一種垃圾毒素,人類很多疾病的產(chǎn)生都與自由基有關(guān),自由基可直接或間接調(diào)控酪氨酸酶的表達,調(diào)控黑色素的合成,引起皮膚炎癥、加速皮膚黑色素的產(chǎn)生。所以,抑制自由基的產(chǎn)生從一定程度上可以抑制黑色素的產(chǎn)生。常見的自由基有:DPPH、ABTS、超氧陰離子、羥自由基等??赏ㄟ^測試樣品對自由基的抑制率從而表征活性物的抗氧化、美白活性。
(三)黑色素細胞中的黑色素含量測定實驗
黑色素細胞是機體形成黑色素、分泌黑色素的細胞,是皮膚細胞的重要組成之一。所以,通過細胞生物學(xué)法測定黑色素細胞中黑色素含量,是最有力的檢測美白產(chǎn)品的方法。
該實驗多通過在體外培養(yǎng)特定的黑色素瘤細胞模型,采用分光光度法、圖像分析技術(shù)等方法測試細胞內(nèi)酪氨酸酶活性及黑色素含量,從而對待測物質(zhì)的美白功效進行評價。為更好地模擬人皮膚中黑色素細胞的生長、黑色素的分泌,研究黑色素細胞與角質(zhì)形成細胞間的相互作用和美白功效評價,現(xiàn)代生物技術(shù)還常常采用黑色素瘤細胞與角質(zhì)形成細胞共培養(yǎng)模型。
(四)黑色素的轉(zhuǎn)移
黑色素生成后需要進行轉(zhuǎn)移才能到達表皮層,該過程分為兩步:胞內(nèi)轉(zhuǎn)移和胞外轉(zhuǎn)移。胞內(nèi)轉(zhuǎn)移是黑色素細胞受刺激產(chǎn)生的黑色素體,包裹在黑色素細胞中向突起末端遷移。所以,可以通過探究受試物抑制黑色素小體轉(zhuǎn)移的方法,進而評價其美白功效。
角質(zhì)形成細胞黑色素攝取實驗先在正常人表皮角質(zhì)形成細胞培養(yǎng)中加入受試物,后加入帶有熒光的黑色素顆粒,孵化4h后測量培養(yǎng)基中剩余熒光劑量,以此表示抑制物對黑色素轉(zhuǎn)移的抑制效果。
化妝品美白功效評價方法:在體測試法
(一)皮膚顏色測試
客觀儀器評估是通過儀器對受試者使用化妝品前后的皮膚狀態(tài)參數(shù)進行采集,進而對化妝品進行功效評價的一種方法,以數(shù)據(jù)或圖片的形式呈現(xiàn)出來,可以最大限度消除人為因素的影響。
(二)皮膚紅黑色素測試
皮膚的顏色主要由皮膚色素含量及其分布決定,人類皮膚的顏色主要取決于人體皮膚中黑色素和血紅素(紅色素)的含量,快速、準確地測量皮膚中黑色素和血紅素的含量在化妝品的研制、醫(yī)療、美容、藥品和保健品功效檢測方面是非常重要的。MexameterMx18也是常用的測定皮膚色度的一種儀器,其結(jié)果輸出以黑色素指數(shù)(MI)和紅斑指數(shù)(EI)表示,它是基于光譜吸收的原理(RGB),通過特定波長的光照在人體皮膚上的反射量來確定皮膚中黑色素含量,如果測量所得MI越高,說明皮膚中所含的黑色素就越高。
(三)皮膚黑色素含量測試
皮膚顏色是由皮膚中幾種發(fā)色團的存在和比例引起的,主要包含皮膚中的黑色素、血紅素、類胡蘿卜素的含量與分布。皮膚黑色素含量測試是一種客觀的分析方法,可使用光密度測量法量化角質(zhì)層中黑色素的含量。
使用透明膠帶(氰基丙烯酸酯皮膚表面剝離劑(CSSSs)等)等將受試者的皮膚角質(zhì)層剝離,然后將剝離的樣品用Fotana-Masson銀染色,將樣品置于配有內(nèi)部光密度計的顯微鏡下,測定樣品的光透射率,并以220放大倍率拍攝。使用0-10級的灰度判別來評估顏色的密度,從而通過計算來測定角質(zhì)層細胞中的黑色素含量。
(四)皮膚光澤度測試
光澤度是構(gòu)成物質(zhì)表面視覺特征的重要參數(shù)之一。皮膚光澤度直接關(guān)系到光線進入人眼時的視覺效果,平時我們所說的容光煥發(fā)指的就是皮膚的光澤度。所以,測定皮膚的光澤度一定程度上也可以表征皮膚的美白效果。
(五)VISIA拍照
應(yīng)用VISIA拍照,通過對圖像的分析也可以評價化妝品的美白功效。對于美白功效評價可選用標準光、UV光和交叉偏振光采集面部圖像,并使用圖像分析軟件進行量化分析,以評估皮膚顏色的變化。
(六)主觀評價法
主觀評價法包括專家評估和志愿者自我評估兩種方法。專家評估多采用有經(jīng)驗的專家通過使用產(chǎn)品前、后膚色的變化就行評分,從而表征志愿者使用產(chǎn)品前后膚色的變化。志愿者自我評估多采用調(diào)查問卷的形式,志愿者對自我膚色的改善情況進行評估。但主觀評價法多與客觀儀器評價等其他方法結(jié)合,從而全面地表征化妝品的美白功效。
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