化妝品眼刺激性試驗方法雞胚絨毛尿囊膜試驗介紹:測試化妝品對眼的刺激強度

148次 2025.01.06

  隨著生活水平的提高,大眾對化妝品安全性的要求也越來越高,越發(fā)關注產品的天然、溫和、無刺激等特性。眼刺激性評價是化妝品原料及產品安全性評價的主要內容。傳統(tǒng)眼部刺激試驗采用試驗動物進行,如經典的 Draizer免眼試驗,不僅外推到人具有一定的風險,而且造成動物極大的痛苦。


  近年來,在全球化動物保護運動的影響下,多種替代動物試驗的體外方法得到開發(fā)和應用,其中眼刺激性替代試驗有雞胚絨毛尿囊膜試驗(Hen's egg test on the chorioallantoic membrane, Het -Cam Test)、重組人角膜組織模型(Human Corneal Epithelium Models,HCEM)、中性紅攝取試驗(Neutral Red Uptake Test,NRU)、紅細胞融血試驗(Red Blood Cell Test,RBC)等。在這些替代試驗中,雞胚絨毛尿囊膜試驗因其費用低、操作簡便與人體試驗結果相關性高等原因,已成為目前化妝品及化學品眼刺激性體外試驗的主要研究方法之一。




  作為第三方檢測中心,中科測試機構擁有CMA和CNAS認證檢測資質,檢測設備齊全,數(shù)據科學可靠,可出具國家認可的化妝品眼刺激性試驗報告。


  眼刺激性試驗方法


  將化妝品樣品用去離子水配制成質量分數(shù)為1%的溶液。


  參照出入境檢驗檢疫行業(yè)標準中化妝品眼刺激性/腐蝕性的雞胚絨毛尿囊膜試驗的標準,采用反應時間法,將9日齡雞胚進行照蛋檢查,在蛋殼表面標記氣室位置;用牙科鋸齒彎鑷剝去帶標記的蛋殼部分,暴露白色蛋膜。


  用吸管吸取適量質量分數(shù)0.9%NaCl溶液使蛋膜濕潤后,將溶液傾出。小心用鑷子去除內膜,保證血管膜不受損。分別吸取0.3mL的被測試劑,滴加在絨毛尿囊膜表面,記錄5min內開始出現(xiàn)出血、血管融解、凝血的時間,期間錄影并拍照,每款化妝品樣品做6次平行試驗。


  眼刺激性評分標準


  根據采用反應時間法,即IS(刺激評分)法作為評分標準。根據計算出的IS數(shù)值,按以下范圍對受試物眼刺激性進行分類。


  雞胚絨毛尿囊膜試驗的眼刺激分級為:IS<1、1≤IS<5 、5≤IS<9和  IS≥9分別表示無刺激性、輕刺激性、中度刺激性和重度刺激性4個級別。


  根據文獻,將出血、凝血、血管融解劃分為不同等級。


  出血:1)無出血;2)輕度出血,僅見小血管出血和少量出血(如質量分數(shù)為0.5%ASV作用5 min);3)中度出血,小血管和大血管出血,并有明顯的血液流出(如質量分數(shù)為1%ASV作用5min);4)重度出血,幾乎所有的血管出血,并有大量的血液流出( 如質量分數(shù)為 5% ASV 作用5 min)。


  凝血:1)無凝血;2)輕度凝血,血管內或(和)血管外輕度凝血(如質量分數(shù)為0.2%氧化鈉作用5 min);3)中度凝血,血管內或( 和)血管外中度凝血(如質量分數(shù)為0.3%氫氧化鈉作用5min);4)重度凝血,血管內或(和)血管外重度凝血(如質量分數(shù)為 0.5%氫氧化鈉作用5min)。


  血管融解:1)無血管融解;2)輕度血管融解:僅小血管融解(質量分數(shù)為0.5%ASV作用5min);3)中度血管融解,小血管和大血管融解( 質量分數(shù)為1%ASV作用5min);4)重度血管融解,大血管和全部血管樹都融解( 質量分數(shù)為5%ASV作用5min)。


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