
毒理學(xué)陰道黏膜刺激試驗(yàn)流程及使用動(dòng)物要求


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陰道黏膜刺激試驗(yàn)使用動(dòng)物要求
選用健康、初成年的雌性白色家兔,同一品系,體重2.0kg~2.5kg。試驗(yàn)前應(yīng)該檢查動(dòng)物陰道口有無分泌物、充血、水腫和其他損傷情況。如果有炎癥或者損傷,應(yīng)該棄用。最好選擇動(dòng)物的非發(fā)情期做試驗(yàn)。
通常選用大鼠、兔或犬。給藥容積可參考臨床擬用情況或不同動(dòng)物種屬的最大給藥量。給藥頻率根據(jù)臨床應(yīng)用情況,通常每天1~2次,至少7天,每次給藥與粘膜接觸至少4小時(shí)。
觀察內(nèi)容:陰道~部位、臨床表現(xiàn)(如疼痛癥狀)和陰道分泌物(如血、粘液)等,給藥后動(dòng)物死亡和剖檢結(jié)果,局部組織有無充血、水腫等現(xiàn)象,并進(jìn)行陰道和生殖系統(tǒng)病理組織學(xué)檢查等。
陰道黏膜刺激試驗(yàn)流程
(1)稀釋使用的消毒劑采用黏膜消毒時(shí)應(yīng)用液5倍濃度的溶液作為受試液。若應(yīng)用液為原液的消毒劑則用原液作受試液。對(duì)照組采用生理鹽水。
?。?)將長(zhǎng)度為8cm左右的鈍頭軟管與2ml的注射器連接。注射器和導(dǎo)管注滿受試液備用。每只動(dòng)物各準(zhǔn)備一套。
(3)一次陰道黏膜刺激試驗(yàn)的染毒方法:將動(dòng)物仰面固定,暴露出會(huì)陰和陰道口。將導(dǎo)管用受試液或?qū)φ找簼駶?rùn)后輕柔地插入陰道(4cm~5cm),并用注射器緩慢注入2ml受試液,抽出導(dǎo)管,完成染毒。對(duì)照組動(dòng)物用生理鹽水作同樣處理。
?。?)多次陰道黏膜刺激試驗(yàn)的染毒方法按上述進(jìn)行。
染毒方法,每隔24h重復(fù)染毒一次,連續(xù)5d。對(duì)照組動(dòng)物用生理鹽水作同樣處理。
(5)由于動(dòng)物陰道容積的個(gè)體差異,有時(shí)受試液注入后可能有溢出,可用消毒棉或軟紙拭去。
(6)末次染毒后24h,采用氣栓法處死動(dòng)物,剖腹取出完整的陰道,縱向切開,肉眼觀察是否有充血、水腫等表現(xiàn),供病理取材時(shí)參考。然后將陰道放入10%福爾馬林溶液中固定24h以上,選取陰道的兩端和中央3個(gè)部位的組織制片,HE染色后,進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。
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